Leistungen
Genotypisierung von Spermien
GVG Genetic Monitoring hat ein vollkommen neues Verfahren zur STR-Genotypisierung von Spermien für die IVF entwickelt.
STR-Genotypisierung von Spermien für die IVF
Der Erfolg der Erzeugung neuer Mausmodelle hängt davon ab, ob die mES-Zellen im chimären Organismus auch an der Entwicklung der Keimzellen beteiligt waren. Eine Analyse von Spermien aus Chimären mittels Short Tandem Repeat (STR) Genotypisierung kann die Keimbahnvererbungsrate nach einer In-vitro-Fertilisation (IVF) präzise vorhersagen. Dazu wird der Anteil der mES-Zellen und des Donor-Mausstammes mittels genetischen Fingerabdrucks bestimmt.
Die Proben können auf Filterpapier aufgetragen werden (z.B. PerkinElmer 226 Spot Saver RUO Card, siehe Abbildung unten) und anschließend getrocknet und entsprechend beschriftet werden. Der Versand kann bei Raumtemperatur erfolgen. Wichtig: Um die unsichtbare Spermaanhaftung auf dem Filterpapier für die anschließende DNA-Extraktion exakt zu lokalisieren, müssen diese unbedingt in die Mitte der vorgegebenen Kreise platziert werden! Auf der sicheren Seite ist man, wenn der Ort für die Auftragung zuvor mit einem Bleistift als Punkt markiert wird. Ggf. verbliebene Kreise ohne Probenmaterial sollten durchgestrichen werden.
Präparation von Spermien aus der Epididymis (beidseitig): Nachdem die Spermien aus der Epididymis entnommen wurden, werden diese in 180 µl CPA (Cryo Protection Agent) aufgenommen und vermischt. Hiervon werden 3-4 µl pro Filter-spot mittig aufgetragen.
Parallel dazu wird der STR-Genotyp einer Blutprobe desselben Tieres (Probenmenge 5 µl - 10 µl pro Spot) zur Bestätigung der Genotypisierungsdaten verwendet. Blut und Sperma müssen in jeweils zweifacher Ausfertigung eingereicht werden.
Hinweis: Nicht alle Filterpapiere sind für das Auftragen des Probenmaterials gleichermaßen geeignet. Die auf der Abbildung gezeigte PerkinElmer 226 Spot Saver RUO Card wurde von uns erfolgreich getestet. Neben einem günstigen Preis besitzt sie auch alle erforderlichen Umverpackungen für eine ordnungsgemäße Beschriftung der Probe und einen kontaminationsfreien Versand.
